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超净工作台在猕猴桃组织培养繁殖与

Time:2020-06-20 Author:立博体育网站

取田间当年生新梢或一年生枝蔓,立博体育网站去叶,用肥皂水将表面刷洗,并用自来水冲洗干净,剪成一芽一段,放入干净烧杯,拿进超净工作台;先用70%酒精过一下,无菌水(用高压锅,在120℃下,灭菌30分钟的水)冲洗3遍;再用0.1%升汞液消毒5~10分钟,无菌水冲洗3遍;然后用酒精灯火焰消毒过的工具(镊子、剪刀、拨针、解剖刀等)剥去鳞片、叶柄,取出带数个叶原基的幼芽接入培养基,半包埋。

外植体接种后放到培养室的培养架上培养。培养条件为:光照1000勒克斯,8~10个小时,暗14~16小时;温度25~28℃。培养1~2周,即可看出是否消毒彻底,有无感染。及时检查,将未感染的外植体转接到新的培养瓶内,丢弃已感染的外植体。

上述接入的外植体培养1~2个月,即可长到2~3厘米长。在超净工作台上,将其剪成约1厘米长茎段,接种到新的培养基中(培养基的配方同上)。剪茎段时所用工具和培养皿(或牛皮纸)都要经过消毒,消毒方法分别同上述酒精灯消毒法和高压消毒法。

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